Judit halshugger Holofernes är en handling beskriven i Judits bok i de deuterokanoniska skrifterna, som ofta har använts som motiv i konsten, målningar och skulpturer, särskilt under renässansen och barocken.
Enligt denna berättelse kan den vackra änkan Judit vinna tillträde till det tält som tillhörde den assyriska generalen Holofernes, som stod i begrepp att förstöra hennes hemstad Bethulia, för att han åtrådde henne. När Holofernes förlorade medvetandet sedan han druckit för mycket, halshöggs han av Judit, som sedan fördes bort i en korg. Motivet avbildades ofta i två versioner: Judit som halshugger Holofernes, eller Judit som håller Holofernes avhuggna huvud. Hon assisterades ofta av sin tjänarinna.[1]